维普资讯 http://www.cqvip.com ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ ＡＮＤ ＭＡＴＥＲＩＡ ＭＥＤＩＣＡ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ２００７ ＶＯＬ。１８ ＮＯ．２ 时珍国医国药２００７年第ｌ８卷第２期 萃取出来。又由于大黄素的酸性大于芦荟大黄酚和大黄素甲醚， ［３］刘冠贤，叶任高，贾志明，等．大黄素对狼疮性肾炎成纤维细胞生物 所以碳酸氢钠萃取出来的主要是大黄素。 学行为的影响［Ｊ］．中国中西医结合杂志，２０００，２０（３０）：１９６． ［４］ 王晓玲，王勤俭，夏延龄，等．大黄素对人肾成纤维细胞抑制作用的 参考文献： ［１］ 王心华，甄永苏．大黄素抑制人高转移巨细胞肺癌ＰＧ细胞的肿瘤 转移相关性质［Ｊ］．癌症，２００１，２０（８）：７８９． 研究［Ｊ］．中国中西医结合肾病杂志，２００２，３（１１）：６２９． ［５］展玉涛，刘宾，李定国，等．大黄素抗肝纤维化的作用机制［Ｊ］．中 华肝脏病杂志，２００４，１２（４）：２４５． ［６］ 孙晓如，胡慧娟．大黄酚及大黄素对激动剂诱导的豚鼠胸主动脉血 管收缩反应的影响［Ｊ］．中国药理与临床，１９９９，１５（４）：１７． ［７］韩公羽．朱砂七抗菌有效成分的研究［Ｊ］．第二军医大学学报， １９８５．６（１）：２７． ［２］Ｙｉｍ Ｈ，Ｌｅｅ Ｙ Ｈ，Ｌｅｅ Ｃ Ｈ，ｅｔ ａ１．Ｅｍｏｄｉｎ，ａｎａｎｔｈｒａｑｕｉｎｏｅｄ ｅｆｉｖａｉｆｖｅｉｓｏ－ ｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｒｈｉｚｏｍｅｓ ｏｆ ｒｈｅｕｍｐａｌｍａｔｕｍ，ｓｅｌｅｃｔｉｖｅｌｙ ｉｎｂｉｂｉｔｓ ｔｈｅ ａｃｔｉｖ— ｉｔｙ ｏｆ ｃａｓｅｉｎｋ ｉｎ ａ ｓｅａｓａ ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔａ Ｍｅｄ，１９９９，６５ （１）：９． 超声波提取龙眼壳总黄酮及鉴别 黄锁义 ，刘海花 ，黎海妮 ，唐玉莲 ，张婧萱 （１．右江民族医学院化学教研室，广西百色２．右江民族医学院检验医学系，广西百色５３３０００； ５３３０００） 摘要：目的为充分利用龙眼壳植物资源，避免资源的浪费，探讨龙眼壳中总黄酮的提取及鉴别方法，方法采用超声波 乙醇浸提法从龙眼壳中提取黄酮类物质，对所提取的黄酮类物质进行验证，并用紫外分光光度法测定含量。结果测得 样品中总黄酮的含量Ｃ＝１．２０４ ｍｇ／ｍｌ，回收率为９８．２９％，其纯度和产率均较高。结论该方法采用全物理过程，无污染， 是提取龙眼壳中黄酮类物质的有效途径。 关键词：超声波提取；龙眼壳；总黄酮；鉴别 中图分类号：Ｒ２８２．５ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００８４３８０５（２００７）０２－０４６１４３２ Ｔｈｅ Ｔｏｔａｌ Ｆｌａｖａｎｏｎｅ ｏｆ Ｌｏｎｇａｎ Ｓｈｅｌｌ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｉｄｅｎｔｉｉｃａｔｉｆｏｎ ｂｙ Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ Ｗａｖｅ ＨＵＡＮＧ Ｓｕｏ—ｙｉ ，ＬＩＵ Ｈａｌ—ｈｕａ ，ＬＩ Ｈａｌ—ｎｉ ，ＴＡＮＧ Ｙｕ—ｌｉａｎ ，ＺＨＡＮＧ Ｊｉｎｇ—ｘｕａｎ （１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｙｏｕｉｆａｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅｆｏｒ Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，Ｂａｉｓｅ，Ｇｕａｎｇｘｉ ５３３０００，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅｐａｒｔ— ｍｅｒｔｔ ｏｆｌａｂｏｒｔａｏｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｙｏｕｊｉａｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｅｌｇｅｆｏｒ Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｓ，ｅ ，Ｇｕａｎｇｘｉ ５３３０００，Ｃｈｉａ）ｎ Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｌｆａｖａｎｏｎｅ ｏｆ ｌｏｎｇａｎ ｓｈｅｌ１．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｌｈｅ ｎａ— ｖｏｎｏｉｄｓ ｗｅｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｂｙ ｅｔｈａｎｏｌ ａｓ ｔｈｅ ｓｏｌｖｅｎｔ ｆｒｏｍ ｌｏｎｇａｎ ｓｈｅｌｌ ｗｉｔｈ ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｗａｖｅ．Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ Ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｆｌａｖａｎｏｎｅ ｏｆ ｌｏｎｇａｎ ｓｈｅｌ１．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖａｎｏｎｅ ｏｆ ｌｏｎｇａｎ ｓｈｅｌｌ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｂｙ ｔｈｉｓ ｍｅｔｈｏｄ Ｗａｓ Ｃ：１．２０４ ｍｇ／ｍｌ ａｎｄ ｔｈｅ ｒａｔｅ ｏｆ ｒｅｃｏｖｅｒｙ Ｗａｓ ９８．２９％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｉｓ ｔｅｘｔ ｐｒｏｖｉｄｅｓ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｕｒｉｉｆｃａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ ｔｏ ｇｅｔ ｔｈｅ ｏｕｔｃｏｍｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｐｕｒｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｓ ｈｉｇｈ．Ｔｈｉｓ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ａ ｐｕｒｅｌｙ ｐｈｙｓｉｃａｌ ｐｒｏｃｅｓｓ ａｎｄ ｈａｓ ｎｏ ｐｏｌｌｕｔｉｏｎ．Ｉｔ ｉｓ ａｎ ｉｄｅａｌ ｗａｙ ｔｏ ｅｘｔｒａｃｔ ｔｈｅ ｆｌａｖａｎｏｎｅ ｏｆ ｌｏｎｇａｎ ｓｈｅｌ１． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｕｌｒａｔｓｏｎｉｃ ｗａｖｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ；Ｌｏｎｇａｎ ｓｈｅｌｌ；Ｔｏｔｌ ｆａｌａｖａｎｏｎｅ； Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ 龙眼（Ｄｉｍｏｃａｒｐｕｓ ｌｏｎｇａｎ Ｌｏｕｒ．）为无患子科龙眼属常绿果 时珍的《本草纲目》也说龙眼有“开胃健脾，补虚益智”的功效。 树，乔木。龙眼的果实俗名桂圆，又名龙目、比目、荔枝奴、益智、 龙眼肉可以治疗虚劳赢弱，失眠键忘，惊悸怔忡，以及脾虚泄泻， 亚荔枝、圆眼、川弹子、骊珠、燕卵、蜜脾、鲛泪、木弹、绣木团 产后浮肿等症。此外，龙眼壳、龙眼花和龙眼皮、根均可以作为配 等 ，为我国著名的亚热带水果。龙眼原产于我国南部和越南 伍的中药 。龙眼壳因为得不到合理的利用，每年都有大量的 北部的南亚热带区域，在我国已有２０００多年栽培历史，是重要的 龙眼壳白白地浪费。龙眼壳中含有大量的生物碱及其他中药成 南亚热带常绿长寿果树，为四大岭南佳果之一。龙眼果品畅销海 分，对中药事业的研究开发具有重要价值 Ｊ。近年来，超声技术 内外，在国际市场上享有较高的声誉，我国龙眼栽培面积和产量 应用于提取植物中的生物碱、苷类、生物活性物质、动物组织浆的 均居世界首位。我国福建、广东、广西及等省是主产区，海 毒质等研究已有报道 ，表明其具有耗能低、效率高、不破坏有 南、云南、四川和贵州等省也有栽培。 效成分的特点。很多研究表明，利用超声波产生的强烈振动、高 李时珍在《本草纲目》中说：“食品以荔枝为贵，而资益以龙 的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等，可加速植物材料中的有 眼为良。”龙眼的营养价值很高，是南方著名佳果之一。龙眼还 效成分进入溶剂，从而增加有效成分的提取率，缩短提取时间，并 是重要的药材。苏颂撰写的《图经本草》，说龙眼“甘平无毒，主 且还可避免高温对提取成分的影响 。但超声技术应用于提取 治五脏邪气，安志压食，久服强魄聪明，轻身不老，通神明”。李 龙眼壳中黄酮类物质的研究尚未见报道，本文用超声波提取龙眼 壳总黄酮及鉴别。现报道如下。 收稿日期：２００５—１０・３１； 修订日期：２００６４）９－２２ ｌ仪器与试剂 仪器ＫＱ５２００ＤＢ型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有 作者简介：黄锁义（１９６４一），男（汉族），广西南宁人，现任右江民族医学院 １．１化学教研室教授，学士学位，主要从事医用化学的教学和科研工作． 限公司）；ＵＶ－７５５Ｂ紫外可见分光光度计（上海分析仪器总厂）； ・４６１・ 维普资讯 http://www.cqvip.com 时珍国医国药２００７年第１８卷第２期ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ ＡＮＤ ＭＡＴＥＲＩＡ ＭＥＤＩＣＡ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ２００７ＶＯＬ．１８ ＮＯ．２ 乙醇溶液，吹干。在可见光下呈灰黄色，在紫外光下呈黄色荧光 斑点。 ｚＦ—Ｉ型三用紫外分析仪（上海顾村光电仪器厂）；ＳＨＢ—ＩＩＩ循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）。 １．２试剂９５％乙醇ＡＲ；亚钠ＡＲ；铝ＡＲ；氢氧化钠 乙酸镁反应：取样品溶液点在滤纸上，滴加１％乙酸镁甲醇 ＡＲ；三氯化铝ＡＲ；盐酸ＡＲ；氨水ＡＲ；冰醋酸ＡＲ；醋酸乙酯ＡＲ；溶液，吹干，紫外光下呈黄色斑点。 丁丁醇ＡＲ；镁砂粉ＡＲ；乙酸镁ＡＲ；芦丁标准品（中国药品生物 盐酸一镁粉反应：取乙醇提取液１ ｍｌ于试管中加镁粉，再加 制品检定所）；新鲜龙眼壳采自广西百色市。 ２方法与结果 入浓盐酸数滴（１次加入），在泡沫处呈紫红色。 ２．４．２纸层析取样品溶液１０ 点在滤纸上。用正丁醇：醋酸 ２．１ 总黄酮成分提取取新鲜龙眼壳，烘干，粉碎。称取龙眼壳粉末约６ ｇ，加８０ ｍｌ ９５％乙醇，超声波提取２．５ ｈ，抽滤。滤渣再加８０ ｍｌ ９５％乙醇，超声波提取２．５ ｈ，抽滤，合并两次滤液，减压回收乙醇至滤液仅剩５～７ ｍｌ为止，放置１００ ｍｌ容量瓶中，用 ：水＝４：１：５（体积比）为展开剂，上行展开５ ｈ，取出晾干。喷 １％氯化铝乙醇溶液。吹干后于紫外光下，可见荧光斑点。 ３讨论 实验结果表明，本实验方法工艺简单，回收率为９８．２９％，利 ６０％乙醇稀释至刻度，得样品液。 ２．２测定方法依据以芦丁为对照品测定龙眼壳中总黄酮的含量，加入铝离子试剂，同时控制适宜ｐＨ值，使黄酮化合物与铝盐形成络合物，在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。 用本文所提供的超声波提取、纯化方法而得到的黄酮类物质其纯 度较高。超声波可以强化乙醇浸提法，达到省时、高效、节能的目 的，此方法采用全物理过程，无任何污染，是一条理想的提取黄酮 类物质的途径，具有广阔的应用前景。 ２．３ 定量实验一总黄酮的含量测定 ２．３．１波长的选择取样品液适量，在０．３０ ｍｌ ５％亚钠溶液存在的碱性条件下，经铝显色后，以试剂为空白参比液在波长处有最大吸收，故测定时选用此波长。 黄酮类化合物是一大类天然产物，广泛存在于植物界，是许 多中草药的有效成分。在自然界中最常见的是黄酮和黄酮醇，其 它包括双氢黄（醇）、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色 迅速吸收，能通过血脑屏障，能进入脂肪组织，进而体现出如下功 ４２０～７００ ａｍ波长范围测定络合物的吸光度，络合物于５１０ ａｍ苷及新黄酮类等 。天然来源的生物黄酮分子量小，能被人体 ２．３．２标准曲线的绘制分别精密吸取芦丁对照液（０．１０ ｍｒ，／能：消除疲劳、保护血管、防动脉硬化、扩张毛细血管、疏通微循 ｍ１）Ｏ．Ｏ０，０．５０，１．Ｏ０，２．Ｏ０，３．Ｏ０，４．Ｏ０，５．Ｏ０ ｍｌ于１０．ｏ０ ｍｌ容量环、抗脂肪氧化、抗衰老、活化大脑及其他脏器细胞的功能。 瓶中，分别加入５％亚钠溶液０．３０ ｍｌ，摇匀，静置６ ｍｉｎ；再加 黄酮类化合物具有抗癌、抗肿瘤、抗心脑血管疾病、抗炎镇 １０％铝溶液０．３０ｍｌ，摇匀，静置６ ｍｉｎ；再加４％氢氧化钠溶痛、免疫调节、降血糖、治疗骨质疏松、抑菌抗病毒、抗氧化、抗衰 液４．ｏ０ ｍｌ，用６０％乙醇稀释至刻度，摇匀，静置１２ ｍｉｎ，以试剂作空白参比液，于５１０ｎｍ处测吸光度。吸光度测定结果如下表： 老、抗辐射等作用 。近年来，世界上掀起了植物药开发的热 潮，植物药以其天然低毒的特点倍受青睐，而黄酮类化合物以其 至 ———— —’ 坌 皇 塞苎 翌 堂皇 ————————— —————一 警 合利用和资源开发。 盏 薹 ． Ｏ．Ｏ１ ’ ０。０３ ０ ０７６ ． 参考文献： “ ： ０ ０４ ０．０５ ．二：： ０ ３３０ ０．４１５ ［１］蔡长河，唐小浪，张爱玉，等．龙眼果肉的食疗价值及其开发应用前 景［Ｊ］．食品科学，２００２，２３（８）：３２８． ［２］刘玉英．我国的龙眼［Ｊ］．中国土特产，２０００，２：２５． ［３］ 叶自行，许建楷．龙眼高产技术问答［Ｍ］．广州：广东科技出版社， 根据上表得回归方程：Ａ＝－６．９６７ １×１０。＋８．４１８ １Ｃ，ｒ ＝０．９９９ ９ ｏ ２００１．５６． ［４］刘祥义．超声波提取元宝枫叶总黄酮方法研究［Ｊ］．云南化工， ２．３．３提取物含量的测定精密吸取样品液０．５０ ｍｌ，置１０．００ ２００３，３０（１）：２７． ｍｌ容量瓶，按标准曲线的制备方法测定吸光度Ａ＝０．５００，根据回 ［５］谢明杰，宋明，邹翠霞，等．超声波提取大豆异黄酮［Ｊ］．大豆科 归方程：Ａ＝一６．９６７１×１０。＋８．４１８１Ｃ，计算样品中总黄酮的含 学，２００４，２３（１）：７５． 量Ｃ：１．２０４ ｍ ｍｌ。 ［６］夏杏洲，张辉，魏传晚．榕树叶中黄酮类化合物的提取条件研究 ２．３．４回收实验精密量取样品液１．００ ｍｌ，加入标准芦丁对照 品２．００ ｍｌ（０．１０ ｇ／ ），同前样品测定的操作方法测定吸光度， ［’ ｌＪ ］ｌ’ 研甍 开发， ， （ ）： ・ ，郭勇・黄酮类化合物药理研究进展［Ｊ］・广东药学， ・ ２出 毫 。９８’ ９ 二．…… ・４定性实验一总黄酮的鉴别 ［８］； ，马传庚，陈志武．黄酮类化合物药理作用研究进展［Ｊ］．中 ： 丢； ； ； … ……… …～～ 。 琳．黄酮类化合物的研究进展［Ｊ］．沈阳医学院学报， ． ｚ・４・ｌ 颜色反厘 ［９］ 王玮王，紫外光下呈色反应：取该样品溶液点在滤纸上，在可见光下 ２００２，４（２）：１１５呈灰黄色，在紫外光下呈灰褐色并有荧光斑点。 ［１０］曹纬国，刘志勤，邵 云，等．黄酮类化合物药理作用研究进展 浓氨水反应：取该样品溶液点在滤纸上，将滤纸在氨水上方 ［Ｊ］．西北植物学报，２００３，２３（１２）：２２４１． 熏０．５ ｍｉｎ，立即在紫外光下观察，呈极明显的黄褐色荧光斑点。 ［１１］姜国芳，谢宗波，乐长高．银杏叶黄酮类化合物的研究进展［Ｊ］．时 三氯化铝反应：取样品溶液点在滤纸上，滴加１％三氯化铝 珍国医国药，２００４，１５（５）：３０６． ・４６２・
