中国调味品 第43卷第8期 China Condiment 基础研究 2018年8月 海鲜沙拉不同低温贮藏过程中 口口口 质变化的研究 李剑卜,张伍金 ,李燕杰h (1.广东食品药品职业学院,广州 510520;2.岭南师范学院,广东湛江524048) 摘要:以海鲜沙拉为研究对象,分男,l测定其在0,4,8℃下冷藏48 h的过程中,蛋白质、脂肪含量、总糖含 量、脂肪氧化TBA和细菌总数对其品质变化的影响。结果表明:在冷藏48 h过程中,蛋白质含量和脂 肪含量均在不断减少;总糖含量呈现先减少后增加再减少的趋势,但总体变化不明显;TBA值逐渐增 加;细茵总数lg对数不断增长,增长速率不断加大,最后细菌总数指数达到10 。由蛋白质、脂肪、总糖、 TBA值和细茵总数变化趋势得知,海鲜沙拉在低温贮藏过程中,品质逐渐变差,宜在48 h内食用完毕, 较0℃的低温贮藏效果最佳。 关键词:冷藏;蛋白质;脂肪;总糖;细茵总数;TBA;品质 中图分类号:TS205.7 文献标志码:A doi:10.3969/j.issn.1000—9973.2018.08.008 文章编号:1000—9973(2018)08—0031—06 Research on the Qual ity Changes of Seafood Salad During Different Low—temperature Storage LI JianH,ZHANG Wu-jin ,LI Yan-jie ’。 (1.Guangdong Food and Drug Vocational College,Guangzhou 510520,China; 2.Lingnan Normal University,Zhanjiang 524048,China) Abstract:Take the seafood salad as the study subject,separately determinate the changes of protein, fat,total sugar,TBA and total bacteria which affect the quality changes of seafood salad during the storage of 48 h under 0,4,8℃.The results show that both protein content and fat content decrease during 48 h refrigerated storage period,the total sugar content decreases firstly and then increases and decreases finally,but the overall change is not significant.The TBA value gradually increases,the total number of lg bacteria increases continuously,the growth rate continues to increase,and the final bacterial count reaches 10。.From the changing trend of protein,fat,total sugar,TBA value and total bacteria,it is found that the quality of seafood salad gradually deteriorates during low—te mperature storage,and it should be consumed within 48 h,compared with the best storage effect at 0 ℃. Key words:low-temperature storage;protein;fat;total sugar;total bacterial count;TBA;quality 收稿日期:2O18一O2—24 *通讯作者 基金项目:基于计算流体力学的复杂食品管网系统中生物被膜的形成与研究(31401591) 作者简介:李剑(1989一).女.广东广州人,助教,研究方向:餐饮和食品。 一3l一 第43卷第8期 中国调味China Condiment 品 基础研究 2018年8月 1 概述 湛江被誉为“海鲜美食之都”,不仅来源于海鲜的 美味,还有它的营养价值 引。海鲜不仅高蛋白,低脂 肪,还含有人体必需的氨基酸,丰富的铁、磷等,具有降 低胆固醇、预防心脑血管疾病等重要功能。据资料统 计,马鲛鱼营养价值较高,虽肉质微酸且相对粗糙,但 高蛋白且富含高度不饱和脂肪酸,经常食用马鲛鱼,有 利于促进大脑发育,预防老年痴呆症,防止视力降低, 同时能为妊娠妇女补充营养,降低肝脏发病率。 色拉(Salad)或称“沙拉”、“沙律”,源于欧美人对 生食果蔬的一种烹饪方式。色拉种类较多,本文主要 采用的是调味类沙拉,其是用白醋和橄榄油、花生油或 豆油等植物油按一定比例调制而成,调制过程中可加 人盐、胡椒和芥末等调味料。色拉的原料以各种蔬菜、 水果为主,其加工虽可减少营养损失,但由于制作的原 料大多数水分高、营养丰富,在适宜的条件下,十分适 合微生物的生长繁殖 ]。 本次研究主要是分别采取了凯氏定氮法、索氏抽 提法、硫酸一苯酚法、硫代巴比妥酸含量测定、细菌含量 变化等方法,测定其在4℃下冷藏48 h过程中的海鲜 品质变化。国内对海鲜沙拉类 研究较少,对鱼肉类 贮藏品质变化、植物类品质变化研究较多,希望本研究 可为以后海鲜沙拉类研究提供更多的理论数据参 考 。一引。 2 材料和方法 2.1 原料 马鲛鱼、生菜、洋葱、蒜、芹菜:购于湛江市赤坎区 海关楼市场;番茄汁、香料、盐、味精、胡椒粉、芥末、白 醋、色拉油、橄榄油:购于湛江市赤坎区步行街爱华广 场超市。 2.1.1主要试剂和设备 2.1.1.1 主要试剂 浓硫酸(分析纯,95.5 );双氧水(分析纯,3O ); 2 9/5硼酸溶液、盐酸溶液、氢氧化钠溶液(均为6 tool/L); 15 三氯乙酸(TCA)溶液;5 三氯乙酸(TCA)溶液; 7.5 三氯乙酸(TCA)溶液;6 苯酚试剂;无菌生理 盐水;标准葡萄糖溶液。 一32— 2.1.1.2主要设备 PHS一3C数显酸度计 上海天达仪器有限公司; FA2004N电子分析天平 河北省虹宇仪器设备有限 公司;UV-260OA型紫外可见光分光光度计 上海尤 尼柯仪器有限公司;SW—CJ一2FD双人单面垂直净化工 作台 郑州朋来仪器有限公司;SXT一06索氏提取 器上海洪纪仪器设备有限公司;YXQ-LS一75G立式 压力蒸汽灭菌锅、HPX-9052ME数显电热培养箱、 GZX一914OMBE数显鼓风干燥箱 上海实业有限 公司;TDZ5台式低速离心机 湖南赫西仪器装备有 限公司;Foss 8400凯氏定氮仪装置广州赛为思仪器 设备有限公司;BCD-215KALM海尔冰箱 上海鲁伊 工贸有限公司;HBM一400B拍击式均质器 郑州南北 仪器设备有限公司。 2.2 方法 2.2.1海鲜沙拉的处理L9] 2.2.1.1海鲜沙拉制作配方 马鲛鱼3000 g;蔬菜200 g;洋葱50 g;大蒜5 g;番 茄汁5 g;香料10 g;盐5 g;胡椒粉2 g;芥末lO g;白醋 适量;色拉油lO g;橄榄油5 g:购于湛江市赤坎区海关 楼市场。 2.2.1.2海鲜沙拉制作方法 先把马鲛鱼、生菜、洋葱、蒜、芹菜预处理,然后在 无菌条件下,把焯过水的马鲛鱼拌人预处理好的生菜、 洋葱、蒜、芹菜,最后加入番茄汁、香料等,全部拌匀即 可。 2.2.2海鲜沙拉蛋白质含量测定 海鲜沙拉蛋白质测定使用凯氏定氮法[1。。,按照 GB/T 5009.5—2010进行。 固体样品于105℃烘干至恒重,然后通过消化反 应、蒸馏吸收、滴定等即可得出实验数据。滴定时由绿 色变淡紫色为滴定终点,按下式进行计算: x一 一 mX(1o/1O0) XFX100%。。 式中:X为样品中蛋白质含量,g;V 为样品中消 耗盐酸标准液体积,mL;V:为试剂空白消耗盐酸标准 液体积,mL;N为盐酸标准溶液当量浓度;0.014为 1 N盐酸标准液1 mL相当于氮克数;m为样品质量体 积,g(mL);F为氮换算为蛋白质系数。 第43卷第8期 中国调味品 基础研究 China Condiment 2018年8月 则每100 g干重中蛋白质含量百分比为:X/m× 100 。 2.2.3海鲜沙拉脂肪含量的测定 海鲜沙拉脂肪的测定使用索氏抽提法,按GB/T 5009.6—2003进行。 取适量样品,置于105℃常压烘干至恒重,然后称 取粉碎干燥后的样品2---5 g,记下准确的重量M。,研 细,全部移人滤纸内,用绳子包扎好。将滤纸包放人脂 肪抽提器的抽提筒内,连接已干燥至恒量的接收瓶 Mo,由抽提器冷凝管上端加入无水乙醚至容积的2/3 处,于65- ̄70℃水浴上加热,使无水乙醚不断回流提 取,抽提6~8 h。取下接收瓶,回收无水乙醚,待接收 瓶内无水乙醚剩1~2 mL时在水浴上蒸干,再于100℃ 干燥2 h,放干燥器内冷却0.5 h后称量。重复以上操 作直至恒量,可记录读数M。。取3次平行测量的平均 值,按下式进行计算: x一 ×1 0oa IV12 式中:X为样品脂肪含量,g;M 为接收瓶和脂肪 含量,g;M。为接收瓶质量,g;M。为样品质量(如果是 测定水分后样品,则按水分后的质量计),g。 2.2.4 海鲜沙拉总糖含量的测定 海鲜沙拉总糖的测定运用硫酸一苯酚法…]。 2.2.4.1制作标准曲线 准确称取标准葡萄糖20 mg于500 mL容量瓶 中,加水至刻度,分别吸取0.4,0.6,0.8,1.0,1.2, 1.4,1.6,1.8 mL,各以蒸馏水补至2.0 mL,然后加入 6 Ao苯酚1.0 mL以及浓硫酸5.0 mL,摇匀冷却,室温 放置20 min,之后于490 nm测光密度,以2.0 mL水 按同样显色操作位空白,横坐标为多糖微克数,纵坐标 为光密度值,得标准曲线。 2.2.4.2样品总糖含量的测定 取样品1 g(湿样)加1 mL 15 TCA溶液研磨,再加 少许5%TCA溶液研磨,倒上清液于1O n1L离心管中,再 加少许5 Ao TCA溶液研磨,倒上清液,重复3次,最后一 次将残渣一起倒人离心管;离心,转速3000 r/rain,共 3次,第1次15 min,取上清液,后2次各5 min,取上 清液到25 mL锥形比色管中,最后滤液保持18 mL左 右;水浴,再向比色管中加人2 mL的6 mol/L盐酸后 摇匀,在96℃水浴锅中水浴2 h;定容取样,水浴后,用 流水冷却后,加入2 mL的6 mol/L氢氧化钠摇匀,定 容至25 mL容量瓶中,吸取0.2 mL样品液,以蒸馏水 补至2.0 mL,然后加入6%苯酚l1 0 mL及浓硫酸 5.0 mL,摇匀冷却,室温放置20 min之后于490 nm 处测光密度,每次测定时取双样对照,以标准曲线计算 总糖含量。 2.2.5海鲜沙拉硫代巴比妥酸(TBA)含量的测定 海鲜沙拉TBA值的测定[1。]:准确称取研磨均匀 的海鲜沙拉样品10 g,置于100 mL具塞三角瓶内,加 入5O mL的7.5 的三氯乙酸溶液(含0.1 Ao EDTA), 震摇30 min,用抽滤机进行抽滤,然后移去其上清滤液 5 mL置于25 mL比色管中,加入5 mL 0.02 tool/L TBA溶液(精确称取硫代巴比妥酸2.883 g,加热溶于 90%醋酸,定容到1000 mL容量瓶中),混匀,加塞,置于 9O℃水浴锅中保温40 rain,取出冷却1 h,移入小试管 内离心5 rain(1600 r/rain),上清液倒人25 mL比色管 中,加入5 mL氯仿,摇匀,静置,分层,吸出上清液,分 别在532 nm和600 nm波长处比色(同时做空白对照 试验),记录吸光值,并按下式计算TBA值: TBA(rag/100 = × ×72.06X100。 2.2.6海鲜沙拉细菌总数的测定 海鲜沙拉细菌总数的测定按照GB 4789.2—2010 进行[1引。以无菌手续对组成色拉的主要原料和制成 品各取10 g为检样,做1:10递增稀释,取1 mL样液 倾注平板,每个稀释度做2个平皿,倒人凉至45℃的 营养琼脂培养基约15 mL,并转动平皿使其混合均匀; 待培养基凝固后,置37℃温箱内倒置培养24 h,取出, 计数。 2.3数据处理 采用Excel和SPSS 11.5.0软件进行数据统计。 所有样品均做3次平行,测定结果以平均值±标准差 (Means士SD)表示。 3结果与分析 3.1 海鲜沙拉冷藏过程中蛋白质含量变化 一33— 第43卷第8期 2018年8月 中国调味品 China Condiment 基础研究 矗 5 4 3 2 l 6 6 6 6 ∞ m∞∞ ∞ 舳 8 棚 加 蝗 正 嘲 U IZ Z4 j6 4 冷藏时间(h) 图1海鲜沙拉在0。4,8℃冷藏48 h蛋白质含量变化 Fig.1 The changes of protein content of seafood salad during the storage of 48 h under 0。4.8℃ 由图1可知,海鲜沙拉在0,4,8℃条件下冷藏48 h 过程中,蛋白质含量一直下降,相对来说,0。C冷藏过 程的下降速率较慢,前36 h从127.15 g/100 g下降到 116.688 g/100 g,而在8℃时蛋白质下降速率较快, 从127.15 g/100 g下降到116.688 g/100 g,同一温度 下,后期的下降速率更快。主要原因和冷藏的温度有 关,温度越低,冷藏过程中,海鲜沙拉呼吸较缓慢,消耗 较少,同时细菌增长缓慢,消耗的蛋白质也较少,后期 细菌增长较快,消耗的蛋白质急剧增加,导致蛋白质后 期急剧下降。这与海鲜沙拉的感官值变化趋势也是一 致的,从而可以推断出海鲜沙拉在不同的条件下冷藏 48 h过程中,蛋白质含量不断下降,沙拉品质在不断变 差,其中最低温的冷藏效果更佳,蛋白质含量较高。 3.2海鲜沙拉冷藏过程中脂肪含量变化 术 卿 缸 嚣 普 咯 0 12 24 36 48 冷藏时间(h) 图2海鲜沙拉在0。4。8℃冷藏48 h脂肪含量变化 Fig.2 The changes of fat content of seafood salad during the storage of 48 h under 0.4.8℃ 由图2可知,海鲜沙拉在0,4,8℃条件下冷藏48 h 过程中,脂肪含量一直在不断减少,含量由0 h的 6.64 ,分别降到48 h的5.82 ,5.76%。5.72 。在 48 h内,脂肪含量前期下降速率较大,下降趋势明显, 一34一 后期下降趋势较缓慢,在0℃冷藏条件下,脂肪下降速率 较明显和均匀;在4℃冷藏条件下,前期脂肪下降率较明 显,前24 h从6.4391 9/6下降到5.9771%;而在8℃,前 24 h内,脂肪含量从6.4391 下降到5.9605%。据分析, 主要原因是随着冷藏时间的增加,脂肪被细菌分解,前 期引起细菌的大量繁殖,脂肪被大量消耗,故脂肪前期 迅速减少,后期细菌大量增长,而其增长空间有限,细 菌的竞争繁殖,优胜劣汰,故对脂肪的消耗也相对前期 少些。同时脂肪含量的变化和感官分值趋势一致,所以 脂肪含量的变化与海鲜沙拉品质变化也是相一致的。 随着时间延长,脂肪含量不断减少,沙拉品质不断变差。 3.3海鲜沙拉冷藏过程中总糖含量变化 3.3.1葡萄糖标准曲线 0.54 0.一口0一理 45 O-36 0.27 0.18 0.09 l6 24 32 40 48 56 64 72 80 葡萄糖傲克数( g) 图3葡萄糖标准曲线 Fig.3 The standard Curves of glucose 由图3可知,以测定的吸光度值为纵坐标,葡萄糖 微克数为横坐标,曲线回归方程为Y—O.0068x一 0.0009,其中相关系数为R。=0.9953,结果表明:葡萄 糖微克数在0.093~0.481 g范围内,吸光度值和葡 萄糖微克数呈现良好的线性关系。 3.3.2海鲜沙拉冷藏过程中总糖含量变化 0 12 24 36 48 冷藏时间(h) 图4海鲜沙拉在0,4.8℃冷藏48 h总糖含量变化 Fig.4 The changes of total sugar of seafood salad during the storage of 48 h under 0.4,8℃ 由图4可知,海鲜沙拉在O,4,8℃冷藏48 h过程 第43卷第8期 中国调味品 基础研究 China Condiment 2018年8月 中,随着时间变化,其含量变化呈现波动状态,总的 变化不明显。总糖含量分别从4.3748 btg波动到 4.1506,4.0469,3.9452/.tg,差值仅为0.4296 btg。冷 藏整个过程中均呈现先增加后减少再增加再减少的波 动,中途有一定的增长或者减少的趋势,但总体波动趋 势不大。波动较明显的后期,尤其是24~36 h之间, 增长速率最大也最明显,如4℃的总糖直接从 4.2261/.tg直接升到9.135 btg;最后36~48 h之间减 少速率也较大,从9.135/zg降到4.0469 btg。从总的 曲线来看,海鲜沙拉在保存过程中,总糖含量随时间变 化趋势没有呈现逐渐增长或者逐渐下降的趋势,只呈 现波动趋势。在冷藏48 h之内,后期会有稍微明显的 波动。尽管总糖一直呈现波动趋势变化,但是最大值 和最小值的差值仅为0.4296 g,变化微乎其微,总的 来说,总糖变化不明显。 由图4实验数据可以得出结论:海鲜沙拉在0,4, 8℃条件下冷藏48 h过程中,对总糖影响不大,总糖 含量随时问变化呈现波动性,没有明显的变化,只是上 升或者下降趋势,总糖含量几乎不发生变化。 3.4海鲜沙拉冷藏过程中菌落总数变化 6.5O 6.0o 喾5.50 5.00 4.50 翘4.o0 器3.50 3.oo 0 12 24 36 48 冷藏时间(h) 图5海鲜沙拉在0,4。8℃冷藏48 h菌落总数变化 Fig.5 The changes of aerobic bacterial count of seafood salad during the storage of 48 h under 0。4-8℃ 由图5可知,海鲜沙拉在0,4,8℃冷藏48 h过程 中,随着时间的变化,细菌总数在不断上升,前24 h之 内,细菌增长速度较慢,在8℃冷藏过程中1g对数从 4.15 cfu/g增长至4.62 cfu/g,仅增加了0.47 cfu/g, 而在24~48 h之间,细菌总数增长速率非常大,分别 从24 h的4.49,4.57,4.62 cfu/g增长到48 h的5.16, 6.04,6.1 cfu/g,据分析,原因很可能是海鲜沙拉营养 丰盛,比较容易滋生细菌,开始时细菌较少,繁殖较慢, 在一定的营养物质和空间的适应下,后期细菌竞争大 量繁殖,也达到空前的阶段,并且在48 h时,细菌总数 达到了lO ,这是细菌开始的一个标志。 由文献E14,151可知,当细菌量达到1o。时,该食 品品质变差,开始发生变质,所以由图5可知,海 鲜沙拉在4℃条件下冷藏过程中,细菌不断增长,品质 不断变差,到第48 h,细菌量已经达到食品变质 的终点,故海鲜沙拉在4℃冷藏时,适宜在48 h内食 用完毕。 3.5海鲜沙拉冷藏过程中脂肪氧化变化 170 165 }嚣 番 110 0 l2 24 36 48 冷藏时问(h) 图6海鲜沙拉在0。4,8℃冷藏48 h脂肪氧化 【TBA值)变化 Fig.6 The changes of TBA value of seafood salad during the storage of 48 h under 0.4-8℃ 由图6可知,海鲜沙拉在0,4,8℃冷藏48 h过程 中,TBA值随着时间的变化,呈现逐渐变大的趋势,整 个变化趋势较均匀,整体前期的变化速率稍大,在0。 4,8℃冷藏过程中,分别由0 h的120.4009 mg/100 g 升至48 h的135.4297,150.1238,160.5397 mg/100 g。 在0℃贮藏过程中,O~12 h之间,TBA值增长较慢,变化 较小,仅增长了0.4690 mg/100 g;而在8℃冷藏过程中, 0~12 h之间,TBA明显上升,上升了2.8369 mg/100 g, 说明海鲜沙拉保存12 h后品质变差,原因可能是存放 了一段时间,细菌开始增长,脂肪开始氧化加快;接着 在最后2个时间段,24~36 h之间和36~48 h之间, 脂肪氧化值增长速率相当,相对前一个时间段稍微缓 慢了一些,可能原因是随着冷藏时间的延长,细菌滋 生,氧化分解了营养物质脂肪,最后分解速率变慢与细 菌增长所需营养物质和空间等有关。随着时间的延 长,脂肪氧化值在不断增长,海鲜沙拉品质在不断变 差。 4 小结 本实验中,测定了海鲜沙拉在0,4,8℃条件下冷 一35— 第43卷第8期 2018年8月 中国调味品 China Condiment 基础研究 藏48 h过程中蛋白质含量、脂肪含量、总糖含量、TBA 要细化,可以增加数据的精密化,同一沙拉不同的仪器 值变化、细菌总数变化,来研究其品质变化趋势。 通过实验得出以下结论:海鲜沙拉在0,4,8℃条 件下冷藏48 h过程中,总糖含量变化不明显,含量在 测定对比,比如可以测定沙拉的精密pH值、软硬度 (使用质构仪进行,使用正交表分析)和电子鼻分析,考 虑更多和沙拉变质有关的因子,如不同菌群的影 4.3748 4.1506,ug之间波动,差值仅为0.2242 Izg。 从总的曲线来看,海鲜沙拉在保存过程中,总糖含量随 时间变化,没有呈现明显的逐渐增长或者逐渐下降的 趋势,只呈现波动趋势。 而在营养指标中,蛋白质含量随着时间的变化却 在不断减少,在0℃冷藏过程中,O~36 h之间减少趋 势比较平缓,从127.15 g/100 g降到116.688 g/100 g, 仅减少了lO.462 g/lO0 g,而在36~48 h之间,减少 剧烈,降到101.1875 g/lO0 g,减少了15.5005 g/i00 g; 相对来说,在4℃冷藏过程中,前36 h之间,下降了 25.9625 g/lO0 g,下降较快;而在8℃冷藏过程中,前 36 h之间,下降了33.275 g/lO0 g,很明显,冷藏的时间 越长,蛋白质下降的速率越大;脂肪含量随时间变化也 不断减少,下降速率较均匀,在0,4,8℃条件下冷藏 48 h过程中,从6.4391 分别降到了5.8209 , 5.7609 ,5.7209 ,这2个营养指标在冷藏过程中呈 现下降趋势,并且随着冷藏温度的升高,下降越多。 而在卫生指标中,TBA值随着时间的变化在不断 增大,整个过程增长速率比较均匀,在0,4,8℃条件下 冷藏48 h过程中,分别从0 h的120.4009 mg/100 g增 长到48 h的120.4009,150.1238,160.5397 mg/lO0 g; 细菌总数lg对数随着时间变化也在不断增长,前24 h 内增长较缓慢,从4.15 du/g分别增长到4.49,4.57, 4.62 cfu/g;在24 ̄48 h之间,细菌增长较快,分别增 长了0.67,1.47,1.48 cfu/g,在4℃和8℃冷藏48 h 时,细菌总数指数已经达到了lO。,即使未达到1O ,但 是蛋白质和脂肪含量的不断减少,总糖趋于平稳的变 化,TBA和细菌总数的不断上升,这些变化趋势已经 表明,海鲜沙拉的品质已经逐渐在下降E16,173,这和感 官指标分值是相一致的,感官指标从原来的优秀等级, 纯正的香味,无异味,无粘度,无颜色的变化等变为后 续的劣质等级,有异味,粘度增大,颜色的改变等。 从以上数据可以看出,海鲜沙拉的最佳低温贮藏 时间在48 h以内,但是本文的研究数据有限,思路需 一36一 响,更有助于沙拉的品质研究。 参考文献: [1]王宇希,应建平.光唇鱼与厚唇鱼肌肉营养成分的研究[J]. 安徽农业科学.2012.40(21);10909-10910. 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