肠道细菌抗生素抗性基因的定量检测方法[发明专利]

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专利名称：肠道细菌抗生素抗性基因的定量检测方法专利类型：发明专利

发明人：黄志坚,曾燊正,刘健,侯冬伟,何建国申请号：CN201710374609.9申请日：20170524公开号：CN1072518A公开日：20171017

摘要：本发明公开了一种肠道细菌抗生素抗性基因的定量检测方法。包括如下步骤：S1.提取肠道细菌总DNA；S2.以肠道细菌总DNA为模板，PCR扩增抗生素抗性基因和16S rRNA基因，将扩增产物连接至克隆载体，然后转化宿主菌，获得阳性克隆；将阳性克隆扩繁后抽提质粒，测定其拷贝浓度，10倍梯度稀释成标准品模板，通过荧光定量PCR检测建立拷贝数与Ct值之间的标准曲线；S3.将阳性质粒和样品进行荧光定量PCR扩增，计算样品中携带的抗生素抗性基因拷贝数，得到抗生素抗性基因的相对含量。本发明方法安全环保，价格低廉，步骤简单，耗时短，结果稳定可靠，重复性好，灵敏度高，实用性强，简便快速，具有十分广阔的应用前景。

申请人：中山大学

地址：510275 广东省广州市海珠区新港西路135号

国籍：CN

代理机构：广州粤高专利商标代理有限公司

代理人：陈卫

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