・７０・ 微生物学免疫学进展２０１２年第４Ｏ卷第４期Ｐｒｏｇ ｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ａｕｇ．２０１２，Ｖｏ１．４０，Ｎｏ．４ ・综述・ 抗菌肽抗菌机制及其应用研究进展 王兴顺 ，耿艺介 ，李文楚 综述；邓平建 审校 （１．华南农业大学动物科学学院，广州５１０６４２；２．深圳市疾病预防控制中心，深圳５１８０５５） 摘要：抗菌肽是一类小分子肽，具有广谱的抗菌活性。以往对抗菌肽抗菌机制的研究主要集中在细菌细胞膜的作 用上，包含“桶板”模型、“毯式”模型，“环形孔”模型和“凝聚”模型。近年来相继发现某些抗菌肽可以作用于细菌 细胞内部，与核酸物质结合，阻断ＤＮＡ复制、ＲＮＡ合成；影响蛋白质合成；抑制隔膜、细胞壁合成，阻碍细胞；抑 制胞内酶的活性。本文从胞内机制和胞外机制两个角度对抗菌肽的抗菌机制进行综述，以期阐明各类抗菌肽的作 用机制，为进一步研究菌株耐药性、杀菌效果及其杀菌机制提供科学根据。 关键词：抗菌肽；抗菌活性；胞内机制；胞外机制 中图分类号：Ｑ５１６ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００５—５６７３（２０１２）０４—００７０—０７ Ａｄｖａｎｃｅｄ ｒｅｓｅａｒｃｈｅｓ ｉｎ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ＷＡＮＧ Ｘｉｎｇ—Ｓｈｕｎ ，ＧＥＮＧ Ｙｉ—Ｊｉｅ ，ＬＩ Ｗｅｎ—Ｃｈｕ ，ＤＥＮＧ Ｐｉｎ－Ｊｉａｎ （ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｓｏｕｔｈ Ｃｈｉｎａ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１０６４２，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ａｒｅ ｓｍａｌｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｗｉｔｈ ｂｒｏａｄ—ｓｐｅｃｔｒｕｍ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ．Ａｂｏｕｔ ｔｈｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｍａｉｎｌｙ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｃｅｌｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ“ｂａｒ— ｒｅｌ－ｓｔａｖｅ ｍｏｄｅｌ”。“ｃａｒｐｅｔ ｍｏｄｅｌ”。“ｔｏｒｏｉｄａｌ ｐｏｒｅ ｍｏｄｅｌ’’ａｎｄ“ａｇｇｒｅｇａｔｅ ｍｏｄｅｌ”ｉｎ ｔｈｅ ｐａｓｔ．Ｓｏｍｅ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｈａｖｅ ｂｅｅｎ ｆｏｕｎｄ ｒｅｃｅｎｔｌｙ ｔｈａｔ ｔｈｅｙ ｃｏｕｌｄ ｃｏｍｂｉｎｅ ｗｉｔｈ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ ｍａｔｅｒｉａｌ；ｂｌｏｃｋ ＤＮＡ ａｎｄ ＲＮＡ ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ；ａｆｆｅｃｔ ｐｒｏ— ｔｅｉｎ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ；ｒｅｓｔｒａｉｎ ｔｈｅ ｄｉａｐｈｒａｇｍ ｃｅｌｌ ｗａｌｌ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ｂｌｏｃｋ ｃｅｌｌ ｄｉｖｉｓｉｏｎ；ｉｎｈｉｂｉｔ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｔｈｅ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ｂａｃ— ｔｅｒｉａ ｉｎｓｉｄｅ．Ｔｏ ｅｌｕｃｉｄａｔｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ｖａｒｉｏｕｓ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ，ｂｏｔｈ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ａｎｄ ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ａｎｔｉ— ｂａｃｔｅｒｉｌ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｆａｏｒ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｗｅｒｅ ｄｉｓｃｕｓｓｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｐａｐｅｒ．Ｉｔ ｗｏｕｌｄ ｐｒｏｖｉｄｅ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ｆｕｒｔｈｅｒ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ａｇａｉｎｓｔ ｄｒｕｇ－ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｓｔｒａｉｎ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ；Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ；Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ；Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ 抗菌肽（Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ，ＡＭＰｓ）是指有机 体在真核生物的核糖体和原核生物非核糖体合成的 小分子碱性多肽。如昆虫抗菌肽、杆菌肽、多粘菌素 等ｌ１１。其中昆虫抗菌物质种类繁多，品种多样，分 布广泛 。 诱导产生抗菌肽，并发现其具有杀菌谱广，耐热等基 本特性。此后数年间，人们相继从细菌、真菌、两栖 类、昆虫、高等植物、哺乳类动物乃至人类中发现并 分离获得１ ０００多种具有抗菌活性的多肽。ＡＭＰｓ 具有广谱抗菌作用，其对革兰阳性菌、革兰阴性菌、 真菌均有抑杀作用，还可以抗原虫、抗病毒以及杀伤 动物体内的肿瘤细胞却不破坏动物体内的正常细 胞，是一类极具潜力的肽类抗生素 ｊ。抗菌肽在快 速杀菌的同时，还具有不易产生耐药性，不会导致脓 昆虫体内最早纯化的可诱导性抗菌肽是天蚕素 Ｃｅｃｒｏｐｉｎｓ，是由瑞典科学家Ｂｏｍａｎ等 在惜古比天 蚕（Ｈｙａｌｏｐｈｏｒａ ｃｅｃｒｏｐｉａ）体内注射Ｅ．ｃｏｌｉ Ｋｌ２Ｄ３１诱导 产生并命名。黄自然等 用柞蚕蛹注射大肠杆菌 毒症，同时中和内毒素等特性 Ｊ。目前已经成为各 收稿日期：２０１２—０５—０４；修回日期：２０１２—０５－２０ 国对抗菌领域的研究热点。 基金项目：国家自然科学基金（８１０７２３２３） 作者简介：王兴顺（１９８７），女，硕士研究生，主要从事昆虫生物化学 与分子生物学研究。 根据结构可将抗菌肽分为：①单链无半胱氨酸 残基的ｏｔ螺旋，或由无规则卷曲连接的两段ｏｔ螺旋 组成的肽；②富含某些氨基酸残基但不含半胱氨酸 残基的抗菌肽；③含１个二硫键的抗菌多肽；④有２ 通信作者：邓平建，Ｅ－ｍａｉｌ：ｓｚｄｐｊ２００２＠１６３．ＣＯＩＩＩ 微生物学免疫学进展２０１２年第４Ｏ卷第４期Ｐｒｏｇ ｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ａｕｇ．２０１２，Ｖｏ１．４０，Ｎｏ．４ ・７１・ 个或２个以上二硫键、具有 ．折叠结构的抗菌肽；⑤ 由其它已知功能的较大的多肽衍生而来的具有抗菌 活性的肽＿８］。按抗菌肽产生的来源又可分为：①昆 虫抗菌肽，鳞翅目、鞘翅目、双翅目、半翅目、膜翅目、 蜻蜓目等多种昆虫都能诱导产生各种抗菌肽，包括 膜，抗菌肽的脂水两亲性结构能够选择性的结合于 细菌细胞膜形成膜孔道，破坏其胞膜完整性而发挥 杀菌作用。革兰阳性菌胞膜上的磷壁酸和革兰阴性 菌胞膜上的脂多糖均带有负电荷。当阳离子抗菌肽 靠近细菌胞膜时，抗菌肽能竞争性地取代膜表面上 的二价阳离子Ｍｇ 或Ｃａｎ，与磷壁酸或脂多糖之间 天蚕素类和昆虫防御素等 ；②植物源抗菌肽，是 植物自身合成的能够防御环境中微生物侵害的一类 形成静电引力，进而贴附到细菌胞膜上 。在抗菌 小分子多肽。包括硫素、植物防御素、脂转移蛋白、 橡胶蛋白类、打结素类、凤仙花素等；③鱼类抗菌肽， 是鱼体天然免疫的重要组成部分，是一类小分子蛋 白质，其结构与组成复杂多样；④哺乳动物抗菌肽， 在吞噬细胞和黏膜上皮细胞表达，主要有防御素 （Ｄｅｆｅｎｓｉｎｓ）、Ｃａｔｈｅｌｉｃｉｄｉｎｓ和富组蛋白（Ｈｉｓｔａｔｉｎｓ）三 种；⑤两栖类来源的抗菌肽，如蛙皮肽；⑥微生物源 抗菌肽，如乳酸链球菌肽（Ｎｉｓｉｎ），多黏菌素，杆菌肽 等。 各种结构和来源的抗菌肽已经在医药，农业，畜 牧等技术领域得到了成功的应用。由于常用抗生素 抗药性的日益增长，新抗生素的开发利用引起了人 们浓厚的兴趣。在开发利用动物源抗菌肽直接用于 临床的药物中，有局部给药、口服药和系统给药的各 种产品 Ｊ。通过植物转基因技术，已经成功地获得 了一些抗病品种，如转基因烟草 “』、番茄、辣 椒 、桑树等。由于抗生素的滥用所引起抗药性的 矛盾日益尖锐，耐药“超级菌”引发民众恐慌，欧盟 便更禁止使用抗生素，销往欧盟的各种饲料添加剂 必须经过抗生素检测，已有越来越多的厂家选择安 全无毒的抗菌肽等作为饲料添加剂，因此抗菌肽在 饲料加工业中发挥着重要的作用，其应用前景广阔。 关于抗菌肽的作用机制也引起了广泛的关注。 １９８１年以来，国内外已有很多关于抗菌肽活性机理 的研究报道，但是目前还无一种理论可对抗菌肽的 活性机理给出充分的解释。已用于研究其活性机理 的方法主要有显微镜技术、膜模型方法、荧光染色技 术、离子通道技术、圆二色谱技术、固态－核磁共振分 析技术等 ｂ 。 目前，国内外从事抗菌肽的研究进展较快。本 文在查阅了大量抗菌肽文献资料的基础上，试图从 抗菌肽杀菌机制方面进行概述，了解国内外的研究 前沿，提炼其研究和应用重点，为进一步研究菌株耐 药性、抗菌肽对耐药菌株的杀菌效果及其杀菌机制 提供科学根据。 １ 抗菌肽胞外杀菌作用机制 抗菌肽胞外杀菌机制主要是作用于细菌细胞 肽与细菌胞膜的相互作用下，肽的疏水部分与胞膜 磷脂的疏水头基结合形成肽．脂超分子复合物并插 入到胞膜中，而肽的亲水部分与胞膜脂质结合构成 通道周壁，形成跨细菌胞膜的通道。多数抗菌肽杀 菌作用的基本机制就是通过形成这种跨膜通道破坏 细菌胞膜的完整性，导致细胞内容物大量外流、胞外 水分大量内流，使细胞内渗透压发生改变，最后细菌 失去正常胞膜保护而死亡 。目前，研究发现了四 种胞膜渗透作用的模型。 １．１“桶板”模型（Ｂａｒｒｅｌ－ｓｔａｖｅ ｍｏｄｅ１） “桶板”模型是Ｅｈｒｅｎｓｔｅｉｎ和Ｌｅｃａｒ早在１９７７年 提出¨ ，而抗菌肽作用于细胞膜的作用方式由Ｏｒｅｎ 等＿１ 给出解说。即结合于细胞膜表面的抗菌肽相 互聚合，以多聚体形式插入细胞膜双分子层中，形成 横跨细胞膜的离子通道。离子通道形成后外界的水 分可渗入细胞内部，细胞质也可渗透到外部。由于 失去能量，严重时细胞膜就会崩解而导致细胞死亡。 这个模型有三个特征：①抗菌肽在垂直细胞膜的方 向上形成孔或渠道；②膜脂不会镶嵌在孔道里，也不 会结合到抗菌肽上；③所形成的孔道是一个明确的 动态结构 。采用“桶板”模型机制发挥作用的抗 菌肽，一般包含两亲性的 螺旋，疏水性的 螺旋、 折叠片层的结构，或同时含有这些结构。抗菌肽 ＬＳ３是人工合成的两亲性的 螺旋肽，是由疏水的 亮氨酸（Ｌ）和亲水的丝氨酸（Ｓ）组成的２１个残基肽 （ＬＳＳＬＬＳＬ）。Ｇｋｅｋａ和Ｓａｒｋｉｓｏｖ 在抗菌肽ＬＳ３与 二棕榈酰磷脂酰胆碱（ＤＰＰＣ）脂双层相互作用的研 究中进一步探讨了“桶板”模型中孔道的形成机制。 研究结果显示，在跨膜形成的木桶状毛孔是由内径 约０．５２ ｎｍ的跨膜螺旋肽组成，而每个孔道又由６ 个 螺旋肽组装而成，组装过程中极性的亲水残基 丝氨酸在孔道内部，而非极性的疏水残基亮氨酸则 在孔道外侧，这个过程主要运用膜电位，因为螺旋内 部Ｎ．端带正电，ｃ．端带负电，使电荷不均匀地分布 在孔道内以增加孔道稳定。“桶板”模型确认了抗 菌肽的两亲性结构，即亲水性和疏水性的 螺旋， 但很明显不支持膜脂双层结构与抗菌肽的结合学 ・７２・ 微生物学免疫学进展２０１２年第４０卷第４期Ｐｒｏｇ ｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ａｕｇ．２０１２，Ｖｏ１．４０，Ｎｏ．４ 说，垂直方向孔道的形成若无疏水端的膜上“锚定” 就仍有深入研究其机制的必要性。 １．２“毯式”模型（Ｃａｒｐｅｔ ｍｏｄｅ１） Ａｒｅｎｉｃｉｎ是 折叠结构的抗菌肽，具有， 谱抗菌活 性。Ｚａｋｈａｒ等 对Ａｒｅｎｉｃｉｎ的作用机制、空间结构 和膜型成孔平面脂质双层动态等方面的研究表明， “毯式”模型是由Ｐｏｕｎｙ等 提出的，即抗菌肽 平行于细胞膜排列，如同一张地毯覆盖于磷脂膜外 Ａｒｅｎｉｃｉｎ的抗菌活性是由２个、３个或４个／３结构肽 二聚体和脂质分子组装的环毛孑Ｌ模型实现的。“环 形孔”模型较好地支持了昆虫抗菌肽的作用模式， 即肽的疏水端与膜双层的头部牢固结合，相互作用 的结果形成跨膜通道，引起蛋白泄露，与电镜观察的 结果相吻合。 表面。与其他模型一样，阳离子抗菌肽通过静电作 用结合到细胞膜，覆盖在磷脂双层上。当抗菌肽浓 度达到临界值时，被覆盖区域的细胞膜因稳定性降 低而出现显著的弯曲从而破裂，此过程中不形成通 道。以“毯式”模型发挥作用的抗菌肽分子多含有 折叠结构。从蛾血淋巴中提取的抗菌肽Ｃｅｃｒｏｐｉｎ Ｐ１，采用偏光衰减全反射傅立叶变换红外光谱 （ＡＴＲ．ＦＴＩＲ技术）对Ｃｅｃｒｏｐｉｎ Ｐ１的研究发现，这种 肽最初不进入疏水环境而是平贴在细胞膜表面，从 而形成不稳定的磷脂胞膜，导致膜破坏。Ｏｒｉｏｎｉ 等＿ｌ 采用荧光光谱和分子动力学技术模拟抗菌肽 ＰＭＡＰ．２３的研究结果支持了“毯式”模型的理论。 Ｌ６ｐｅｚ．Ｏｙａｍａ等 对阳离子抗菌肽Ｂａｃｔｅｎｅｃｉｎ与二 棕榈酰磷脂酰胆碱（ＤＰＰＣ）脂双层及十四酰磷脂酸 （ＤＭＰＧ）间相互作用的研究探讨“毯式”模型的形 成机制。肽吸附在ＤＰＰＣ上的过程，在显微镜下显 示为ＤＭＰＧ聚集组装肽，形成类似于地毯形状的长 丝状网格，以形成孔状结构。“毯式”模型属于 折 叠结构占主导的抗菌肽作用模式，显然是由／３折叠 结构特征所决定，长丝状网格是 折叠中的活性分 子与膜相互作用的结果。这种模型并不适用于 螺旋为主的昆虫抗菌肽Ｃｅｃｒｏｐｉｎ，因为电镜下观察 到内容物泻出的瞬间，菌体并未崩溃，应该是通道形 式造成的。 １．３“环形孔”（虫孔）模型（Ｔｏｒｏｉｄａｌ ｐｏｒｅ ｍｏｄｅ１） “环形孔”模型是由Ｍａｔｓｕｚａｋｉ等 驯提出的， 该模型即抗菌肽与细胞膜表面结合后，其疏水区的 移位可使细胞膜疏水中心形成裂口，并引发磷脂单 分子层向内弯曲，直至孔道形成。与“桶板”模型不 同的是抗菌肽始终与磷脂膜头部相结合，两者共同 形成跨膜孔道。细菌素乳酸乳球菌曲５（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ ＱＵ ５）产生的抗菌肽Ｌａｃｔｉｃｉｎ Ｑ的抗菌机制是 形成环形孔模型，Ｙｏｎｅｙａｍａ等 从Ｌａｃｔｉｃｉｎ Ｑ脂质 体泄露的荧光标记开始追踪研究发现Ｌａｃｔｉｃｉｎ Ｑ能 使小蛋白泄露，如活细胞中的绿色荧光蛋白。其作 用模型如下：①迅速结合到细菌外膜；②形成４．６ ｎｍ的孔隙，使蛋白质与脂质体泄露；＠Ｌａｃｔｉｃｉｎ Ｑ分 子在细胞膜上形成从膜外侧到内侧环形孔。从海洋 多毛纲Ａｒｅｎｉｃｏｌａ ｍａｒｉｎａ中分离到的阳离子抗菌肽 １．４“凝聚”模型（Ａｇｇｒｅｇａｔｅ ｍｏｄｅ１） “凝聚”模型是由Ｗｕ等 首次提出的，即结合 于细胞膜表面的抗菌肽通过自身结构的改变，与磷 脂分子形成类似胶束状的复合物，以凝聚物形式跨 越细胞膜，形成穿孔。与“虫孔”模型不同，在此模 型中抗菌肽没有特定的取向。Ｌｅｏｎｔｉａｄｏｕ等 运用 多肽的移位双分子层和分子动力学机理模拟爪蟾抗 菌肽ＭＧ－１２肽脂质问的相互作用证实了这个模型。 “凝聚”模型注重了抗菌肽与膜结合的动态过程，但 结合过程中抗菌肽没有特定取向，这就难以说明抗 菌肽的两亲性仅螺旋结构与其功能之间的关系。 上述这四个模型的共同点都是抗菌肽与细胞膜 的结合。Ｌｏｈｎｅｒ等 ８ｊ 对从非洲爪蟾颗粒状皮肤腺 体中分离的抗菌肽Ｐｅｐｔｉｄｙｌ—ｇｌｙｃｉｎｅ—ｌｅｕｃｉｎｅ—ｃａｒｂｏｘｙ— ａｍｉｄｅ（ＰＧＬａ）进行研究发现，抗菌肽结合细胞膜是 有选择性的。同样Ｇｕｏ等 就抗菌肽如何结合到 细胞膜进行的研究结果表明，抗菌肽分子并非简单 的结合在膜上，而是在结合的地方形成结构域，因而 这样膜的结合是有选择性的，而不是随机的。Ｗｏｎ 等 。。以蛇毒液中提取的抗菌肽Ｍｙｏｔｏｘｉｎ ＩＩ合成短 阳离子肽ｐＥＭ一２，并证明静电作用、阳离子肽、磷脂 双分子层之间的相互作用影响着ｐＥＭ－２与膜的结 合。关于各个胞膜渗透模型都有相应的实验作为依 据，但是不能具体归纳出哪些类型或是哪种性质的 抗菌肽是属于哪一种胞膜渗透模型，这须要进一步 研究。 不同抗菌肽胞膜渗透的作用模型虽然有所不 同，但最终都作用在细胞膜上，引起阳离子等胞质内 容物大量渗漏，胞外水分大量内流，使细胞不能保持 正常的渗透压而引起细胞迅速死亡。图１是各模型 的简略图。如图１所示，胞膜渗透的整个过程最初 是由ＡＭＰ吸附到细菌细胞膜，这些过程并不是各自 的过程。在经典的抗菌肽破坏细胞膜的模型 中，当膜上抗菌肽的浓度达到临界值时就会插入脂 质膜内，形成孔道，形成“桶板”模型。抗菌肽覆盖 ・７４・ 微生物学免疫学进展２０１２年第４Ｏ卷第４期Ｐｒｏｇ ｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ａｕｇ．２０１２，Ｖｏ１．４０，Ｎｏ．４ ２．１与核酸结合。阻断ＤＮＡ复制和ＲＮＡ合成 一些抗菌肽能与核酸结合，阻碍ＤＮＡ复制。 Ｍａｒｃｈａｎｄ等 的体外试验表明，Ｉｎｄｏｌｉｃｉｄｉｎ是牛中 性粒细胞来源的抗菌肽，仅由１３个氨基酸残基组 成，富含脯氨酸和色氨酸。可与单链、双链ＤＮＡ共 价结合，干扰ＤＮＡ—ＨＩＶ整合酶复合物的形成，抑制 ＨＩＶ．１整合酶的催化活性。在此基础上，Ｎａｎ等 ｊ 通过对Ｉｎｄｏｌｉｃｉｄｉｎ的修饰，发现其类似物ＩＮ．３和 ＩＮ一４也可以透过大肠杆菌质膜，在胞质内积累，并 与ＤＮＡ分子结合。郝刚等 对抗菌肽Ｂｕｆｏｒｉｎ ＩＩ 结合大肠杆菌核酸的研究中指出，与ＤＮＡ结合的肽 首先吸附基本氨基酸的磷酸基团，然后依靠静电引 力使肽插入到Ｄ｝ＮＡ双链的凹槽中，从而干扰苯丙氨 酸和核酸碱基的合成。此外，其他昆虫抗菌肽也可 以与核酸结合，如刘忠渊等 用光谱分析增色效应 试验证实家蚕抗菌肽Ｃｅｃｒｏｐｉｎ—ｘＪ可与溴化乙 锭（ＥＢ）竞争性地结合金黄葡萄球菌染色体ＤＮＡ。 ２．２影响蛋白质合成 发挥胞内损伤作用的某些抗菌肽可在阻碍 ＤＮＡ复制、ＲＮＡ合成的同时还可抑制蛋白质结合。 因为当抗菌肽阻断ＤＮＡ和ＲＮＡ的合成后，蛋白质 的翻译因缺少模板而会同时受到抑制；反之，当参与 基因复制、转录的蛋白质合成受抑制时，核酸的合成 亦会受到影响。早在１９９９年Ｃａｓｔｌｅ等 研究发 现，源于昆虫的富含脯氨酸抗菌肽Ａｐｉｄａｅｃｉｎｓ与大 肠杆菌共孵育１ ｈ后，ＤＮＡ合成速率降低。Ｚｈｏｕ 等 对抗菌肽Ａｐｉｄａｅｃｉｎｓ的进一步研究发现，Ａｐｉ． ｄａｅｃｉｎｓ能竞争性地结合大肠杆菌细胞膜蛋白异构 体，抑制细胞蛋白酶ＹＦＳＨ的活性，并增强细胞 浆蛋白ＵＤＰ－３一Ｏ一酰基一Ⅳ一乙酰氨基脱乙酰基酶的 活性，从而使磷一脂失去平衡。另外，Ｙｅｎｕｇｕ＿３ 等发 现用抗菌肽ＨＥ２ａｌｐｈａ、ＨＥ２ｂｅｔａｌ或ＨＥ２ｂｅｔａ２处理 大肠杆菌后也能抑制大肠杆菌的ＤＮＡ、ＲＮＡ和蛋白 质的合成。通过扫描电子显微镜还可观察到细菌胞 膜起皱和细胞内容物泄露。 ２．３阻碍细胞 抗菌肽可影响隔膜、细胞壁合成，阻碍细胞分 裂。细菌素是由细菌分泌的一类抗菌肽，是抗菌肽 家族中的重要一员。细菌素Ｌｃｎ９７２是乳酸乳球菌 ＩＰＬＡ ９７２合成的，含６６个氨基酸残基。Ｍａｒｔｌｎｅｚ 等 研究发现处于指数生长期的乳酸乳球菌与细 菌素Ｌｃｎ９７２共同孵育后，细菌隔膜的内陷受阻，进 一步研究发现，Ｌｃｎ９７２主要通过与众多细胞壁前体 中的Ｌｉｐｉｄ Ｉ／特异性结合，从而影响隔膜形成，阻碍 细胞。Ｌａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ是革兰阳性菌分泌的一类细 菌肽，抗菌肽Ｎｉｓｉｎ又称乳链菌肽，是目前研究最为 清楚的Ｌａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ类抗菌肽。Ｈａｓｐｅｒ等 的研究 证明，Ｎｉｓｉｎ不仅可通过细胞膜渗透机制杀灭细菌， 还可将Ｌｉｐｉｄ ＩＩ从细胞壁合成位点或隔膜处移除， 以阻断细胞壁的合成。此后，Ｂｏｎｅｌｌｉ等 发现 Ｌａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ家族中的细菌素Ａｌｌｉｄｅｒｍｉｎ、Ｐｉｄｅｒｍｉｎ均 可通过胞膜攻击作用和抑制细胞壁合成的双重机制 杀灭细菌。 ２．４抑制胞内酶活性 抗菌肽可与酶结合使其失去活性进而抑菌或杀 菌。ｓｕ等 对六肽ＷＲＷＹＣＲ进行研究发现， ＷＲＷＹＣＲ能够抑制ＤＮＡ修复的相关酶活性，阻碍 ＤＮＡ修复，导致ＤＮＡ断裂和染色体分离。苏琦等 研究表明，ＭｃｃＪ２５可抑制呼吸链中琥珀酸盐脱氢酶 和ＮＡＤＨ脱氢酶的活性，改变氧的消耗速率。Ｖｉｎ— ｃｅｎｔ等 的研究发现，由大肠杆菌质粒编码的细菌 素Ｍｉｃｒｏｃｉｎ Ｊ２５（ＭｃｃＪ２５）与ＲＮＡ聚合酶结合后，可 阻断ＲＮＡ聚合酶中用于合成ＲＮＡ的碱基的运输 和合成过程中的副产物的排出，从而阻止底物与酶 的活性中心结合、抑制ＲＮＡ聚合酶的活性。富含 脯氨酸的抗菌肽Ａｐｉｄａｅｃｉｎ、Ｌ—ｐｙｒｒｈｏｃｏｒｉｃｉｎ和Ｄｒｏｓｏ－ ｃｉｎ可与７０ ｋＤ的细菌分子伴侣ＤｎａＫ特异性结合， 通过抑制ＤｎａＫ的ＡＴＰａｓｅ活性、阻断蛋白质折叠来 杀灭细菌。进一步的研究还显示，当Ｌ．ｐｙｒｒｈｏｃｏｒｉ— ｃｉｎ、Ｄｒｏｓｏｃｉｎ与大肠杆菌共同孵育后，不仅可以降 低ＡＴＰａｓｅ的活性，也可使细菌中碱性磷酸酶和 － 半乳糖苷酶的活性降低。 ３展望 ２０１１年，Ｄ Ｃｏｓｔａ等 的研究结果表明抗生素 耐药性是一种普遍的自然现象，此外，近年来国内外 细菌耐药监测的相关研究数据表明，细菌的抗生素 耐药率及耐药谱正在以惊人的速度增长和扩 展 ，现有的基于微生物种间作用产生的抗生素 类抗菌药物将面临前所未有的危机，给感染性疾病 的控制带来了潜在的危机，而抗菌肽作用机制的研 究为推进和完善抗菌肽的研究与应用具有重要的意 义。目前研究抗菌肽的作用途径有胞内和胞外两种 机制，分别涉及细胞的胞膜与胞内大分子的结构和 功能变化。另外，抗菌肽的分子质量大小、序列结 构、所带电荷量、立体构象以及疏水亲水性等因素直 接或间接的影响抗菌肽的生物活性。 由于抗菌肽来源丰富，结构复杂，迄今为止抗菌 微生物学免疫学进展２０１２年第４Ｏ卷第４期Ｐｒｏｇ ｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ａｕｇ．２０１２，Ｖｏ１．４０，Ｎｏ．４ ・７５・ 肽的相关作用机制的研究仍处于较为分散和模糊的 状态，急需对抗菌肽家族基本的抗菌作用进行综合 性的研究和归纳总结，通过较为明确的抗菌肽作用 机制研究，推进抗菌肽的临床药物的开发与应用。 此外，抗菌肽近２０年来一直是国内外研究的热 点，但至今还缺乏重大突破，主要的难点有以下几 点：①是抗菌肽产品来源问题，天然抗菌肽作为生物 经诱导产生的体液免疫成分，其含量极低；直接从生 物细胞提取和纯化抗菌肽，工艺复杂，成本昂贵且资 ［９］ Ｚａｓｌｏｆｆ Ｍ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉｌ ｐｅｐｔａｉｄｅｓ ｏｆ ｍｕｌｔｉｅｅｌｌｕｌａｒ ｏｒｇａｎｉｓｍｓ［Ｊ］． Ｎａｔｕｒｅ，２００２，４１５（６８７０）：３８９—３９５． ［１０］ＤｅＧｒａｙ Ｇ，Ｒａｊａｓｅｋａｒａｎ Ｋ，Ｓｍｉｔｈ Ｆ，ｅｔ ａ１．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ａｌｌ ａｎ— ｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ ｖｉａ ｔｈｅ ｃｈｌｏｒｏｐｌａｓｔ ｇｅｎｏｍｅ ｔｏ ｃｏｎｔｏｌｒ ｐｈｙｔｏ－ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｂａｃｔｅｒｉａ ｎｄ ａｆｕｎｇｉ［Ｊ］．Ｐｌｎｔａ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ Ｎｏｖｅｍｂｅｒ， ２００１，１２７，（３）：８５２—８６２． ［１１］黄自然，徐飞，楚庄雄．农杆菌携带柞蚕抗菌肽基因转人烟草 的研究［Ｊ］．华南农业大学学报，１９９２，１３（４）：１－５． ［１２］刘清神，李乃坚，黄自然．Ｔ３代抗菌肽转基因辣椒的ＰＣＲ检 测及青枯病抗性测定［Ｊ］．广东蚕业，２００５，３９（２）：２Ｏ一２４． 源有限；通过化学合成制备的抗菌肽，成本过高，且 难以保持与天然抗菌肽结构及活性的等同性；利用 基因工程技术表达重组抗菌肽虽然是批量制备抗菌 肽的可行方法，但由于抗菌肽分子质量小且对宿主 细胞有毒性，易被宿主细胞分解，氨基酸组成不均 衡，表达效率较低，常以融合蛋白形式表达，难以获 得纯品 。②尽管抗菌肽在理论上完全可以用于 感染性疾病的治疗，但由于其抗菌作用和抗菌谱相 对于传统抗生素仍显得较为微弱而泛化，而且作为 一种外源性蛋白质，长期使用抗菌肽并不能完全排 除引起超敏反应等免疫病理性疾病的风险，所以目 前抗菌肽在临床上还仅限于皮肤、口腔、支气管局部 疾病的治疗。③对于抗菌肽在药物开发研究中，抗 菌肽的毒理性和药理药效方面的研究还不够深入， 仍须要在抗菌肽的使用剂量、给药方式、作用时间等 方面进行更深入的研究。 参考文献 马文山，廖富蒴，范雪云．细菌抗菌肽的研究进展及其应用 ［Ｊ］．生物技术通报，２００８，（３）：３９－４３． ［２］ 李文楚．昆虫抗菌肽研究进展［Ｊ］．广东蚕业，２０００，３４（２）：５１— ５９． ［３］ Ｂｏｍａｎ Ｈ Ｇ．Ｎｉｓｓｏｎ Ｉ．Ｒａｓｍｕｓｏｎ Ｂ．Ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｄｅ— ｆｅｎｓｅ ｓｙｓｔｅｍ ｉｎ Ｄｒａｓｏｐｈｉａｌ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ １９７２，２３７（５３５２）：２３２－ ２３５． ［４］ 黄自然，王少姬．注射大肠杆菌诱导柞蚕蛹血淋巴产生抗菌物 质［Ｊ］．华南农学院学报，１９８１，２（１）：６５—６７． ［５］ Ｈｕａｎｇ Ｚ Ｒ，Ｚｈｅｎｇ Ｔ Ｈ，Ｌｉａｎｇ Ｙ Ｚ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｏａｋ Ｓｉｌｋｗｏｒｍ ｆ Ａｎｔｈｅｒａｅａ ｐｅｒｎｙｉ）ｐｕｐａｅ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ，１９８７，３２（９）：６２９－６３２． ［６］ Ｄｏｕｒａｄｏ Ｆ Ｓ，Ｌｅｉｔｅ Ｊ Ｒ，Ｓｉｌｖａ Ｌ Ｐ，ｅｔ ａ１．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｓｋｉｎ ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｆｒｏｇ Ｌｅｐｔｏｄａｃｔｙｌｕｓ ｓｙｐｈａｘ［Ｊ］．Ｔｏｘｉ－ ｃｏｎ，２００７，５０（４）：５７２—５８０． ［７］ 马清泉，董娜，曹艳萍．利用精氨酸和缬氨酸设计新型 －螺旋 抗菌肽［Ｊ］．微生物学报，２０１１，５１（３）：３４６—３５１． ［８］ Ｂｅｌｌ Ａ．Ａｎｔｉｍａｌａｒｉｌａ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ：ｔｈｅ ｌｏｎｇ ａｎｄ ｔｈｅ ｓｈｏｒｔ ｏｆ ｉｔ［Ｊ］． Ｃｕｒｔ Ｐｈａｒｍ Ｄｅｓ，２０１１，１７（２５）：２７１９－２７３１． ［１３］ Ｏｒｉｏｎｉ Ｂ，Ｂｏｃｃｈｉｎｆｕｓｏ Ｇ，Ｋｉｍ Ｊ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｅｒｔｕｒｂａｔｉｏｎ ｂｙ ｔｈｅ ａｎｔｉｍｉｅｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ ＰＭＡＰ一２３：ｆｌ ｆｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ａｎｄ ｍｏ－ ｌｅｃｕｌａｒ ｄｙｎａｍｉｃｓ ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｉｍ ＢｉｏＩ）ｈｙｓ Ａｃｔａ，２００９，１７８８ （７）：１５２３—１５３３． ［１４］Ｌ６ｐｅｚ—Ｏｙａｍａ Ａ Ｂ，Ｔａｂｏａｄａ Ｐ，Ｂｕｒｂｏａ Ｍ Ｇ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｃａｔｉｏｎｉｃ ｐｅｐｔｉｄｅ ｂａｃｔｅｎｅｃｉｎ ｗｉｔｈ ｍｉｘｅｄ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ ｍｏｎｏ・－ ｌａｙｅｒｓ ａｔ ｔｈｅ ａｉｒ—ｗａｔｅｒ ｉｎｔｅｒｆａｃｅ［Ｊ］．Ｊ Ｃｏｌｌｏｉｄ Ｉｎｔｅｒｆａｃｅ Ｓｃｉ， ２０１１，３５９（１）：２７９—２８８． ［１５］Ｙｏｎｅｙａｍａ Ｆ，Ｉｍｕｒａ Ｙ，Ｏｈｎｏ Ｋ，ｅｔ ａ１．Ｐｅｐｔｉｄｅ—ｌｉｐｉｄ ｈｕｇｅ ｔｏ－ ｏｒｉｄａｌ ｐｏｒｅ，ａ ｎｅｗ ａｎｔｉｍｉｅｒｏｂｉｌａ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ａ ｌａｃｔｏ— ｃｏｃｃａｌ ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎ，ｌ ａｃｔｉｃｉｎＱ［Ｊ］．Ａｎｔｉｍｉｅｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ， ２００９，５３（８）：３２１１—３２１７． ［１６］ Ｋｈａｎｄｅｌｉａ Ｈ，Ｉｐｓｅｎ Ｊ Ｈ，Ｍｏｕｒｉｔｓｅｎ Ｏ Ｇ．Ｔｈｅ ｉｍｐａｃｔ ｏｆ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｏｎ ｌｉｐｉｄ ｍｅｍｂｒａｎｅｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｉｍ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ－Ｂｉｏｍｅｍ— ｂｒａｎｅｓ，２００８，１７７８（７／８）：１５２８—１５３６． ［１７］Ｈａｌｅ Ｊ Ｄ，Ｈａｎｃｏｃｋ Ｒ Ｅ．Ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｔ— ｉｏｎｉｃ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉｌａ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｏｎ ｂａｃｔｅｉｒａ［Ｊ］．Ｅｘｐｅ￣Ｒｅｖ Ａｎｔｉ－ｉｎ－ ｆｅｃｔｉｖｅ Ｔｈｅｒ，２００７，５（６）：９５１—９５９． ［１８］ Ｅｈｒｅｎｓｔｅｉｎ Ｇ，Ｌｅｅａｒ Ｈ．Ｅｌｅｃｔｒｉｃａｌｌｙ ｇａｔｅｄ ｉｏｎｉｃ ｃｈａｎｎｅｌｓ ｉｎ ｌｉｐｉｄ ｂｉｌａｙｅｒｓ［Ｊ］．ＱｕａｒｔｅｒｌｙＲｅｖｉｅｗｓ ｏｆＢｉｏｐｈｙｓｉｃｓ，１９７７，１０：１－３４． ［１９］ Ｏｒｅｎ Ｚ，Ｓｈａｉ Ｙ．Ｍｏｄｅ ｏｆ ａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｎｅａｒ ａｍｐｈｉｐａｔｈｉｅ ＯＬ—ｈｅｌｉｃａｌ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ［Ｊ］．Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９８，４７（６）：４５１— ４６３． ［２０］Ｈｕａｎｇ Ｙ Ｂ，Ｈｕａｎｇ Ｊ Ｆ，Ｃｈｅｎ Ｙ Ｘ．Ａｌｐｈａ—ｈｅｌｉｃａｌ ｃａｔｉｏｎｉｃ ａｎｔｉｍｉ— ｅｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ：ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ ｏｆ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ［Ｊ］． Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｃｅｌｌ，２０１０，１（２）：１４３－１５２． ［２１］ Ｇｋｅｋａ Ｐ，Ｓａｒｋｉｓｏｖ Ｌ．Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｂａｒｒｅｌ－ｓｔａｖｅ ｐｏｒｅ ｉｎ ａ ｃｏａｒｓｅ－ｇａｉｎｅｄ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｔｈｅ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ＬＳ３ ｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｄ ａ ＤＰＰＣ ｌｉｐｉｄ ｂｉｌａｙｅｒ［Ｊ］．Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ Ｐｈｙｓｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００９， １１３（１）：６－８． ［２２］Ｐｏｕｎｙ Ｙ，Ｒａｐａｐｏｒｔ Ｄ，Ｍｏｒ Ａ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｎｔｉｍｉｅｒｏｂｉｌａ ｄｅｒｍａｓｅｐｔｉｎ ａｎｄ ｉｔｓ ｌｆｕｏｒｅｓｃｅｎｔｌｙ ｌａｂｅｌｅｄ ａｎａｌｏｇｕｅｓ ｗｉｔｈ ｐｈｏｓｐｈｏ— ｌｉｐｉｄ ｍｅｍｂｒａｎｅｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９２，３１（４９）：１２４１６－ １２４２３． ［２３］ Ｍａｔｓｕｚａｋｉ Ｋ，Ｍｕｒａｓｅ Ｏ，Ｆｕｊｉｉ Ｎ，ｅｔ ａ１．Ａｎ ａｎｔｉｍｉｅｒｏｂｉｌａ ｐｅｐ— ｔｉｄｅ，ｍａｇａｉｎｉｎ ２，ｉｎｄｕｃｅｄ ｒａｐｉｄ ｆｌｉｐ—ｌｆｏｐ ｏｆ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｓ ＣＯＵ— ｐｌｅｄ ｗｉｔｈ ｐｏｒｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｅｐｔｉｄｅ ｔｒｎａｓｌｏｅａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｅｍ— ｉｓｔｒｙ，１９９６，３５，（３５）：１１３６１－１１３６８． ［２４］Ｍａｔｓｕｚａｋｉ Ｋ，Ｍｕｒａｓｅ Ｏ，Ｆｕｊｉｉ Ｎ，ｅｔ ａｔ．Ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｃｈａｎ－ ｎｅｌ—ｆｏｒｍｉｎｇ ａｎｔｉｍｉｅｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ，ｍａｇａｉｎｉｎ ２，ａｃｒｏｓｓ ｌｉｐｉｄ ｂｉｌａｙ－ ｅｌｓ ｂｙ ｆｏｒｍｉｎｇ ａ ｐｏｒｅ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９５，３４（１９）：６５２１－ ６５２６． ・７６・ 微生物学免疫学进展２０１２年第４０卷第４期Ｐｒｏｇ ｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ａｕｇ．２０１２，Ｖｏ１．４０，Ｎｏ．４ ［２５］Ｚａｋｈａｒ Ｏ，Ｓｈｅｎｋａｒｅ Ｖ，Ｓｅｒｇｅｙ Ｖ，ｅｔ ａ１．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ａｃｔｉｏｎ ｏｆ ３－Ｈａｉｒｐｉｎ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ ａｒｅｎｉｃｉｎ：ｏｌｉｇｏｍｅｒｉｃ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｉｎ ｄ０ｄｅｃｙｌｐｈｏｓｐｈｏｃｈ０１ｉｎｅ ｍｉｃｅｌｌｅｓ ａｎｄ ｐｏｒｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｉｎ ｐｌａｎａｒｌｉｐｉｄ ｂｉｌａｙｅｒｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１１，５０（２８）：６２５５＿ ６２６５． ［２６］Ｗｕ Ｍ，Ｍａｉｅｒ Ｅ，Ｂｅｎｚ Ｒ，ｅｔ ａ１．Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｄｉｆ－ ｆｅｒｅｎｔ ｃｌａｓｓｅｓ ｏｆ ｃａｔｉｏｎｉｃ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｗｉｔｈ ｐｌｎａａｒ ｂｉｌａｙ— ｅｌｓ ａｎｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｏｆ Ｅｓｃｈｅｒｉｅｈｉａ ｃｏｌｉ［Ｊ］． Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９９，３８（２２）：７２３５－７２４２． ［２７］Ｌｅｏｎｔｉａｄｏｕ Ｈ，Ｍａｒｋ Ａ Ｅ，Ｍａｒｒｉｎｋ Ｓ Ｊ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉｌａ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｉｎ ａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｃｌａ Ｓｏｃｉｅｔｙ，２００６，１２８ （３７）：１２１５６—１２１６１． ［２８］Ｌｏｈｎｅｒ Ｋ，Ｐｒｏｓｓｎｉｇｇ Ｆ．Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｓｔｒｕｃｔｕｒｌａ ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ＰＧＬａ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｍｉｍｅｔｉｃ ｓｙｓｔｅｍｓ［Ｊ］．Ｂｉｏ－ ｃｈｉｍ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ Ｂｉｏｍｅｍｂｒａｎｅｓ，２００９，１７８８（８）：１６５６－ １６６６． ［２９］Ｇｕｏ Ｌ，Ｓｍｉｔｈ—Ｄｕｐｏｎｔ Ｋ Ｂ，Ｇａｉ Ｆ．Ｄｉｆｕｓｉｏｎ ａｓ ａ ｐｒｏｂｅ ｏｆ ｐｅｐ－ ｔｉｄｅ．ｉｎｄｕｃｅｄ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｄｏｍａｉｎ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ『Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ２０１１，５０（１２）：２２９１ ２２９７． ［３０］ Ｗｏｎ Ａ，Ｉｎａｏｕｌ Ａ．Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ ｆｒｏｍ Ｃ— ｔｅｒｍｉｎｕｓ ｏｆ ｒｎｙｏｔｏｘｉｎ Ｉ１ ｗｉｔｈ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ ｍｏｎｏ－ａｎｄ ｂｉｌａｙｅｒｓ ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｉｍ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ—Ｂｉｏｍｅｍｂｒａｎｅ，２００９，１７８８（１）： ２２７７．２２８３． ［３１］Ｎｇｕｙｅｎ Ｌ Ｔ，Ｈａｎｅｙ Ｅ Ｆ，Ｖｏｇｅｌ Ｈ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｅｘｐａｎｄｉｎｇ ｓｃｏｐｅ ｏｆ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｍｏｄｅｓ ｏｆ ａｃｔｉｏｎ［Ｊ］． Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏ１．２０１１，２９（９）：４６４－４７２． ［３２］ Ｂｒｏｇｄｅｎ Ｋ Ａ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ：ｐｏｒｅ ｆｏｒｍｅｒｓ ｏｒ ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ｉｎｈｉｂｉｔｏｍｉｎ ｂａｃｔｅｒｉａ［Ｊ］．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００５，３（３）： ２３８．２５０． ［３３］Ｍａｒｃｈａｎｄ Ｃ，Ｋｒａｊｅｗｓｋｉ Ｋ，Ｌｅｅ Ｈ Ｆ，ｅｔ ａ１．Ｃｏｖａｌｅｎｔ ｂｉｎｄｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ｎａｔｕｒｌａ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉｌａ ｐｅｐｔｉｄｅ ｉｎｄｏｌｉｃｉｄｉｎ ｔｏ ＤＮＡ ａｂａｓｉｃｓｉｔｅｓ ［Ｊ］．Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００６，３４（１８）：５１５７－５１６５． ［３４］Ｎａｎ Ｙ Ｈ，Ｐａｒｋ Ｋ Ｈ，Ｐａｒｋ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｎｇ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｈａｒｇｅ ａｎｄ ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃｉｔｙ ｏｎ ｔｈｅ ｃｅｌｌ ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ，ｍｅｃｈａ— ｎｉｓｍ ｏｆ ａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ａｎｔｉ－・ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ａ Ｔｒｐ－－ｒｉｃｈ ａｎｔｉｍｉ－－ ｅｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ ｉｎｄｏｌｉｃｉｄｉｎ［Ｊ］．ＦＥＭＳ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ Ｌｅｔｔｅｒｓ， ２００９，２９２（１）：１３４－１４０． ［３５］郝刚，施用晖，唐亚丽．抗菌肽ＢｎｆｏｒｉｎⅡ衍生物与大肠杆菌 基因组ＤＮＡ的作用机制［Ｊ］．微生物学报，２０１０，５０（３）：３２８— ３３３． ［３６］ 刘忠渊，金芝赛，郑书涛．家蚕抗菌肽抗菌作用的超微结 构观察及抗菌机理初探【Ｊ］．动物学杂志，２００８，４３ （２）：１４－２０． ［３７］Ｃａｓｔｌｅ Ｍ，Ｎａｚａｒｉａｎ Ａ，Ｔｅｍｐｓｔ Ｐ，ｅｔ ａ１．Ｌｅｔｈａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ａｐｉｄａｅ・ ｃｉｎ ｏｎ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ｉｎｖｏｌｖｅ ｓｅｑｕｅｎｔｉｌａ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｗｉｔｈ ｄｉｖｅｒｓｅ ｔｒａｇｅｔｓ［Ｊ］．Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ，１９９９，２７４（４６）：３２５５５— ３２５６４． ［３８］ Ｚｈｏｕ Ｙ，Ｃｈｅｎ Ｗ Ｎ．ｉＴＲＡＱ—ｃｏｕｐｌｅｄ ２－Ｄ ＬＣ—ＭＳ／ＭＳ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｐｒｏｆｉｌｅ ｉｎ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｉｌ ｉｎｃｕｂａｔｅｄ ｗｉｔｈ ａｐｉ・ ｄａｅｃｉｎ ＩＢ［Ｊ］．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ，２０１１，６（６）：ｅ２０４４２． ［３９］Ｙｅｎｕｇｕ Ｓ，Ｈａｍｉｌ Ｋ Ｇ，Ｆｒｅｎｃｈ Ｆ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ａｃｔｉｏｎｓ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｅｐｉｄｉｄｙｍｉｓ ２（ＨＥ２）ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｓｏｆｏｒｍｓ，ＨＥ２ａｌｐｈ ＨＥ２ｂｅｔａｌ ａｎｄ ＨＥ２ｂｅｔａ２［Ｊ］．Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ Ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｎｄｏｃｒｉ— ｎｏｌｏｇｙ，２００４，２：６１． ［４Ｏ］ ａｒｔｉｎｅｚ Ｂ，Ｂｆｔｔｉｇｅｒ Ｔ，Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ Ｔ，ｅｔ ａ１．Ｓｐｅｃｉｉｆｃ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｔｈｅ ｕｎｍｏｄｉｉｆｅｄ ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎ Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｉｎ ９７２ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｃｅｌｌ ｗａｉｌ ｐｒｅｃｕｒ－ ｓｏｒ ｌｉｐｉｄ ＩＩ［Ｊ］．Ａｐｐｌ Ｅｎｖｉｒｏｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００８，７４（１５）：４６６ ５．４６７０． ［４１］Ｈａｓｔｅｒ Ｈ Ｅ，Ｋｒａｍｅｒ Ｎ Ｅ，Ｓｍｉｔｈ Ｊ Ｌ，ｅｔ ａ１．Ａｎ ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｂａｃｔｅ— ｉｒｃｉｄａｌ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ａｃｔｉｏｎ ｆｏｒ ｌａｎｔｉｂｉｏｔｉｅ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｔｈａｔ ｔａｒｇｅｔ ｌｉｐ— ｉｄ ＩＩ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００６，３１３（５７９３）：１６３６—１６３７． ［４２］Ｂｏｎｅｌｌｉ Ｒ Ｒ，Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ Ｔ，Ｓａｈｌ Ｈ Ｇ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｓｉｇｈｔｓ ｉｎｔｏ ｉｎ ｖｉｖｏ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｌａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ｆｒｏｍ ｇａｌｌｉｄｅｒｍｉｎ ａｎｄ ｅｐｉｄｅｒｍｉｎ ｍｏｄｅ－ｏｆ－ ａｃｔｉｏｎ ｓｔｕｄｉｅｓ［Ｊ］．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，２００６，５Ｏ（４）： ４１４４９．４１４５７． ［４３］ ｓｕ Ｌ Ｙ，Ｗｉｌｌｎｅｒ Ｄ Ｌ，Ｓｅｇａｌｌ Ａ Ｍ．Ａｎ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ ｔｈａｔ ｔａｒｇｅｔｓ ＤＮＡ ｒｅｐａｉｒ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｉｎｈｉｂｉｔｓ Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｇｒｏｗｔｈ ｗｉｔｈｉｎ ｍｕｒｉｎｅ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ［Ｊ］．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅ－ ｍｏｔｈｅｒ，２０１０，５４（５）：１８８８－１８９９． ［４４］ Ｖｉｎｃｅｎｔ Ｐ Ａ，Ｍｏｒｅｒｏ Ｒ Ｄ．Ｔｈｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ｍｉｃｒｏｃｉｎ Ｊ２５［Ｊ］．Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍ— ｉｓｔｙｒ，２００９，１６（５）：５３８－５４９． ［４５］Ｄ Ｃｏｓｔａ Ｖ Ｍ，Ｋｉｎｇ Ｃ Ｅ，Ｋａｌａｎ Ｌ，ｅｔ ａ１．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｓ ａｎｃｉｅｎｔ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，２０１１，４７７（７３６５）：４５７—４６１． ［４６］ Ｃｏｒｎａｇｌｉａ Ｇ．Ｆｉｇｈｔｉｎｇ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ｄｕｅ ｔｏ ｍｕｈｉｄｒｕｇ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ Ｇｒａｍ— ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ［Ｊ］．ＣｌｉｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌＩｎｆｅｃｔ，２００９，１５（３）：２０９・ ２Ｉ１． ［４７］ Ｒｅｈｍ Ｓ Ｊ，Ｔｉｃｅ Ａ．Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ：ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ—ｓｕｓｃｅｐｔｉ— ｂｌｅ Ｓ．ａｕｒｅｕｓ ｔｏ ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ Ｓ．ａｕｒｅｕｓ ａｎｄ ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ—ｒｅ— ｓｉｓｔａｎｔ Ｓ．ａｕｒｅｕｓ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ，２０１０，５１（Ｓ２）：１７６—１８２ ［４８］ ＩＪｉ Ｙ．Ｃａｒｒｉｅｒ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｆｏｒ ｆｕｓｉｏｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐ— ｔｉｄｅｓ ｉｎ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ［Ｊ］．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ Ａｐｐｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ，２００９， ５４（１）：１—９． （本文编辑：王祖森）
